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尊龙凯时基质胶的应用指南

发布时间:2025-02-12   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的Matrigel基质在使用过程中可能会出现色差变化(从淡黄色到深红色),这主要是由于酚红和碳酸氢盐与二氧化碳的相互作用所导致。然而,当与5% CO2平衡后,这种色差会显著减少。在冻融过程中,轻轻摇晃试剂瓶能够使Matrigel均匀分散。需要强调的是,所有操作应在无菌环境中进行,试剂瓶的瓶盖外部可以用70%乙醇擦拭,并自然晾干。为确保Matrigel处于均匀浆液状态,建议使用预冷的移液器。

尊龙凯时基质胶的应用指南

细胞可以在0.5mm厚的Matrigel基质表面生长,或在1mm厚的三维Matrigel基质内部生长。需要注意的是,过度稀释的Matrigel可能形成非胶质的蛋白层,这虽然可以用于细胞贴壁,但不适合细胞的分化研究。同时,可以将冻融后的Matrigel分装在多个小管中,所有分装均需使用预冷的冻存管,以快速冷冻并保存,避免多次冻融造成的影响。

Matrigel在22-35℃的温度环境下能够快速成胶,因此建议在4℃条件下过夜解冻(在4℃时,随着温度升高Matrigel会逐渐成胶)。所有器材在使用前需放置在冰浴中,必须使用预冷的移液管、吸头及小管进行Matrigel的操作。成胶后的Matrigel在424-48小时内可以重新呈液态。

为了保证Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性,稀释浓度不应低于1:3,并可使用无血清培养基进行稀释。Matrigel成胶后应立即使用。以下是推荐的成胶方法:

薄胶成胶方法

1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,直至形成均匀浆液。
2. 将需要使用的培养板放置于冰上,加入浓度为50μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37℃条件下静置30分钟,即可使用。

厚胶成胶方法

1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,使其呈均匀状态。
2. 将培养板放置于冰浴中,将细胞与Matrigel基质混合,确保其均匀悬浮于基质中,加入浓度为150-200μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37℃条件下静置30分钟,完成成胶过程。此方法可使细胞在基质中生长,也可以让细胞直接在胶表面生长。

薄层包被方法

1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,直至均匀浆状。
2. 根据实验需求,使用无血清培养基稀释Matrigel基质,并确定最佳包被浓度。
3. 将稀释后的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中,包被量应至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。

通过以上方法,您可以有效地使用尊龙凯时的Matrigel基质,确保细胞培养与实验的成功。